0.1%吕氏碱性美兰染色的使用方法
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吕氏碱性美兰染色液常用于酵母菌的染色观察,活的酵母细胞还原能力强,能把美兰还原成无色,因此活细胞为无色。死酵母细胞还原能力弱或无还原能力,会被美兰染成蓝色或浅蓝色。
1.滴一小滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液于载玻片中央(注意:滴加染液要适中,否则用盖玻片覆盖时,染液过多会溢出,过少会产生大量气泡)。
2.按无菌操作取少量酵母菌与其混合均匀。(混合时不要剧烈涂抹,以免破坏细胞)。
3.用镊子取一块盖玻片,将盖玻片一边与菌体接触,缓缓将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上(注意要缓慢倾斜,以免产生气泡)。
4.放置约3min后,先用低倍镜后用高倍镜(不用油镜)观察酵母的形态和出芽情况,并用颜色区别死活细胞。