1聽聽主题内容与适用范围聽
本标准规定了小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。聽
本标准适用于食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。聽
2聽聽引用标准聽
聽聽聽聽GB聽4789.28聽聽食品卫生微生物学检验聽聽染色法、培养基和试剂聽
3聽聽设备和材料聽
3．1聽聽温箱：包括聽4±1℃，26±1℃，36±1℃三种。聽
3．2聽聽样品均质器。聽
3．3聽聽无菌平皿。聽
3．4聽聽灭菌吸管：包括聽1聽mL，5聽mL聽及聽10聽mL聽三种，带橡胶乳头的吸管数只。聽
3．5聽聽pH聽试纸：pH聽范围为聽6.0～8.0。聽
3．6聽聽显微镜。聽
3．7聽聽三角瓶。聽
3．8聽聽玻片染色缸。聽
4聽聽培养基和试剂聽
4．1聽聽改良磷酸盐缓冲液聽PSB：按聽GB聽4789.28聽中聽4.46聽规定。聽
4．2聽聽CIN-I聽培养基：按聽GB聽4789.28聽中聽4.47聽规定。聽
4．3聽聽改良聽Y聽培养基：按聽GB聽4789.28聽中聽4.48聽规定。聽
4．4聽聽改良克氏双糖：按聽GB聽4789.28聽中聽4.49聽规定。聽
4．5聽聽山梨醇、鼠李糖、蔗糖、甘露醇等发酵管：按聽GB聽4789.28聽中聽3.2聽规定。聽
4．6聽聽鸟氨酸脱羧酶肉汤：按聽GB聽4789.28聽中聽3.12聽规定。聽
4．7聽聽半固体琼脂：按聽GB聽4789.28聽中聽4.30聽规定。聽
4．8聽聽V-P聽试剂：按聽GB聽4789.28聽中聽3.4聽规定。聽
4．9聽聽无菌矿物油。聽
4．10聽聽碱处理液：0.5%氯化物-0.5%氢氧化钾混合液。聽
4．11聽聽尿素培养基：按聽GB聽4789.28聽中聽4.38聽规定。聽
5聽聽检验程序聽
聽聽聽聽小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序如下：聽
6聽聽操作步骤聽
6．1聽聽样品的采集和处理：与沙门氏菌食物中毒的采集和处理相同。聽
6．聽2聽聽增菌培养：聽将食物样品与改良的磷酸盐缓冲液增菌液以聽1：聽10聽的比例混合，
置聽4℃冰箱进行冷增菌。聽
6．3聽聽碱处理：将肉及其制品的冷增菌液0.5聽mL聽与碱处理液聽4.5聽mL混合15聽s。聽聽
6．4聽聽分离培养：将冷增菌液和碱处理的冷增菌液分别接种CIN-I和改良聽Y聽培养
基，于聽26℃48聽h聽培养后，在聽CIN-I聽上挑取红色牛眼状菌落，在改良聽Y聽上挑取无
色透明、不粘稠的菌落，进行进一步的鉴定。聽
6．5聽聽改良克氏双糖试验：将上述可疑菌落接种改良可氏双糖管，于聽26℃24聽h
培养，将斜面和底部皆变黄者做进一步生化鉴定。聽
6．6聽聽尿素酶试验和动力观察：将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养
基上，注意接种量要大，挑取一接种环，振摇几秒钟，放置于聽26℃2～4聽h，然
后将阳性者接种两管半固体，分别放置聽26℃和37℃孵箱，培养24聽聽h聽检查，如在
26℃有动力者可进行镜检和进一步的生化试验。聽
6．7聽聽染色镜检：将上述可疑菌落做涂片染色，进行显微镜观察，呈革兰氏阴性
球杆菌，有时呈椭圆或杆状，大小为聽0.8～3.0聽um×0.8聽um聽者。聽
6．8聽聽生化特性：将上述可疑的菌落做进一步的生化试验。所有的生化反应皆在
26℃培养。本菌的主要生化特性以及与其他菌的区别见下表。聽
6．9聽聽血清型鉴定：除进行生化鉴定外，亦可做血清型鉴定。目前国内可生产
27聽种聽O聽型血清因子，供各地使用。具体操作方法与沙门氏菌聽O聽因子血清分型相
同。聽
聽附加说明：聽
本标准由卫生部卫生监督司提出。聽
本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。聽
本标准主要起草人王淑颖、周桂莲。聽
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。聽聽聽聽
聽聽聽

聽

上一篇：沙门氏菌检验

下一篇：志贺氏菌检验