先用肉汤培养基复活，此为菌种第一代；从营养肉汤培养物中挑菌液划相应的选择性培养基平板，选择典型菌落，接种于营养琼脂斜面，此为菌种第二代；一个月后，从斜面上挑菌划相应的选择性培养基平板，选择典型菌落，接种于营养琼脂斜面，此为菌种第三代；依次下去，直至第五代，就可以不再接了，可以买新的菌种了。

1.选择复活用的培养基,可选用说明书中推荐的培养基,根据菌株的分类进行选择,请说明购买菌株的类型或名称；

2.选择菌株保存的方法：冷冻真空干燥保藏法(可保存10年以上，需真空冷冻干燥机等设备)、超低温保藏(可保存两年左右，但需有-80℃冰箱)、定期移植保藏法(可保存1-6月) ，请根据实际情况进行选择；

3.准备需要的培养基、保存管、甘油、尖头吸管(有时常规吸管太粗，无法深入菌种管底部)、开启工具等；

4.无菌开启菌种管，将管内干粉溶解转入相关培养基，培养后选择保存菌种的代数；

5.进行验证实验(革兰氏染色、菌落形态、生化试验、血清试验或其他鉴定系统等)，确认后保存菌种，注意整个过程的无菌操作。

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