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    志贺氏菌属检验的标准操作程序



    录入时间:2011-5-11 10:17:18 来源：互联网
    【目的】
    聽聽聽 指导检验伤寒、副伤寒沙门氏菌。
    【该SOP变动程序】
    聽聽聽 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
    【标本的采集】
    聽聽聽 由受检者将采便用已蘸有甘油盐水的棉棒自行插入肛门内，轻轻转动，然后取出，插入带有编号的塑料试管中，交给检验科人员。
    【检验程序】
    聽聽聽 采便→立即划线接种SS平板→培养后挑取可疑菌落接种三糖铁斜面及半固体培养基→生化学试验→血清学试验→报告检验结果。
    【操作步骤】
    聽聽聽 1.聽聽聽聽聽 分离培养
    采便后立即用采便棒划线接种SS琼脂平板。36±1℃培养18-24小时，挑取无色半透明的光滑菌落分解乳糖或迟缓分解乳糖的光滑菌落，接种三糖铁斜面及半固体，36±1℃培养18-24小时。
    聽聽聽 聽2.聽聽聽聽聽 生化学试验
    凡是三糖铁反应符合志贺氏菌属特征者（斜面产碱或不变色，底层产酸，H2S（—），产气（—），但福氏6型产生少量气体）、无动力、革兰氏阴性杆菌、作V-P试验，苯丙氨酸，赖氨酸，柠檬酸盐，葡萄糖铵试验。其结果全部阴性者，作血清学试验。
    聽聽聽 3.聽聽聽聽聽 血清学试验
    挑取三糖铁斜面上的培养物
    聽聽聽 福氏菌的鉴定：凡是与福氏多价血清凝集的菌株，可先用3、4，群6，群7，三种因子血清检查，根据群因子血清反应结果，再用型因子血清检查。福氏菌抗原成分如下
    聽
    聽聽聽 福氏志贺氏各菌型与五型抗原成份
    型
    型抗原
    群抗原
    在群因子血清中的凝集反应
    3、4
    6
    7、8
    a
    I
    1，2，4，5，9………
    +
    -
    -
    b
    I
    1，2，4，5，6，9……
    +
    +
    -
    2a
    Ⅱ
    1，3，4………
    +
    -
    -
    2b
    Ⅱ
    1，7，8，9……
    -
    -
    +
    3a
    Ⅲ
    1（3，4），6，7，8，9…
    （+）
    +
    +
    3b
    Ⅲ
    1，（3，4），6……
    （+）
    +
    -
    4a
    Ⅳ
    1，3，4………
    +
    -
    -
    4b
    Ⅳ
    1，3，4，6………
    +
    +
    -
    5a
    Ⅴ
    1，3，4………
    +
    -
    -
    5b
    Ⅴ
    1，5，7，9………
    -
    -
    +
    6
    Ⅵ
    1，2，（4）………
    （+）
    -
    -
    变种
    —
    1，7，8，9………
    -
    -
    +
    变种
    —
    1，3，4………
    +
    -
    -
    （　）内的抗原可能不存在。
    聽聽聽聽4.聽聽聽聽聽 菌型的判定和结果的报告聽
    聽聽聽 根据生化学试验和血清学分型试验结果，判定菌型，报告结果。
    【质量控制要求】
    聽聽聽1.聽聽聽聽聽 增菌及分离必须保证一个一支增菌管，一块平板，禁止多人一管，多人一块平板。
    聽聽聽2.聽聽聽聽聽 分离平板时平板一半以上应有孤立菌落，以供挑选。

    聽

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