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细菌生化试验——糖类发酵(分解)试验



录入时间:2008-9-12 8:14:15 来源:青岛海博论坛论坛

聽聽聽原理:细菌含有分解不同糖(醇、苷)类的酶,因而分解各种糖(醇、苷)类的能力也不一样。有些细菌分解某些糖(醇、苷)产酸(符号:+)、产气(符号:○),培养基由兰变黄(指示剂溴麝香草酚兰由兰遇酸变黄的结果),并有气泡;有些产酸,仅培养基变黄;有些不分解糖类(符号:-),培养基仍为兰色。
聽聽(一)适用于需氧菌的方法
培养基聽聽用邓亨氏(Dunham)蛋白胨水溶液(蛋白胨1g,氯化钠0.5g,水100ml,pH7.6按0.5~1%的比例分别加入各种糖),每100ml加入1.2ml的0.2%溴麝香草酚蓝(或用1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1ml)作指示剂。分装于试管(每一个试管事先都加有一枚倒立的小发酵管),10磅高压灭菌10分钟。
如在培养基中加入琼脂达0.5~0.7%,则成半固体,可省去倒立的小发酵管。
聽聽聽0.2%溴麝香草酚蓝溶液配法:
聽聽聽溴麝香草酚蓝聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽0.2g聽聽聽聽
聽聽聽0.1N聽NaOH聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽5ml
聽聽蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽95ml
方法:从琼脂斜面的纯培养物上,用接种环取少量被检细菌接种于糖发酵管培养基中(如为半固体,应穿刺),在37℃培养,一般观察2~3天,观察时用上述符号标记之。

(二)适用于厌氧菌的方法
培养基:
蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽20g聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽
氯化钠聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽5g
琼脂聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1g聽
1.6%溴甲酚紫酒精溶液聽聽聽1ml聽
糖聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽10g
硫乙醇酸钠聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1g
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000ml
将胨、盐、硫乙醇酸钠、琼脂和水放于烧瓶内,加热使融化,再加入所需的糖,调整pH到7.0,加入指示剂,分装试管,在10磅高压灭菌15分钟后,做成高层。
聽聽聽聽聽聽聽方法聽聽将厌氧菌的培养物用穿刺接种法接种于上述培养基的深部,于37℃培养。结果观察同需氧菌。

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