铁皮石斛的组织培养与快速繁殖一
录入时间:2009-7-8 10:05:08
来源：青岛海博论坛论坛
摘要：实验以铁皮石斛优良品种的茎段为外殖体，诱导丛生芽，壮苗生根，从而实现大量繁殖。当NAA 的浓度为0.3mg/L , 6-BA 的浓度为5mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。在MS 培养基中，铁皮石斛壮苗生根的最好培养基为MS + 6 - BA ( 2mg/L ) + 20 ％香蕉汁。不同激素浓度的6-BA 对铁皮石斛壮苗生根的影响比较得出，不加6-BA 的培养基小苗生根率低、发根迟、根数少；而加人6-BA 后以大幅度提高生根率，尤以在6-BA 0.4mg/L 的培养基中小苗生根快，根数多。从不同培养基对铁皮石斛试管苗生长的影响看出，幼苗用MS 培养基比用KC 培养基培养生长好。铁皮石斛培养60d 左右时生长速度最快。香蕉提取液能促进生长，从而使苗的生长加快。以MS ＋香蕉汁20 ％的培养基为最好。
关键词：铁皮石斛；组织培养；丛生芽；壮苗生根
铁皮石斛是兰科著名的盆载观花植物，具有很高的观赏价值。近年来，铁皮石斛培养及快速繁殖技术的研究，取得了很大的成果。本实验对药用铁皮石斛茎段进行组织培养，提出了一套快速繁殖程序，为快速育苗提供了有价值的技术资料和科学依据。利用组织培养技术，对药用铁皮石斛进行快速繁殖，是目前解决生产种苗问题的有效方法。
1 材料与方法
1.1 试验材料
铁皮石斛优良品种，来源于日本。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的选取和预处理
将从日本引进的生长旺盛的铁皮石斛健康植株，以茎芽为中心剪下，芽的上下各留0.5cm的茎段，用洗衣粉浸泡20min 左右，取出后再用自来水反复冲洗数次，备用。
1.2.2 外植体的灭菌
将预处理过的外植体用75 ％的酒精溶液灭菌30 s，然后用无菌水冲洗l 次，将茎段腋芽的苞叶拨去，然后将0.1 ％的HgC12 溶液倒人烧杯中灭菌10 min ，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，最后用无菌水冲洗5 、6 次将HgCl2溶液冲净并接种到培养基上。1.2.3 培养基的灭菌
将三角瓶用玻璃纸包好，作好标记。待琼脂冷凝后放入高压灭菌锅中灭菌（121 ℃ 、15min ）。冷却后可放人培养室预培养3d ，没有杂菌污染则可取铁皮石斛材料进行接种。
1.2.4 组织培养室的条件
所有材料均在组织培养室中培养，温度为22 ℃ ，每天光照12h ，光照强度为2O00lx 。
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