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出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法——3



录入时间:2008-12-18 15:08:06 来源:青岛海博论坛论坛生物

附 录聽A聽              
培聽养聽基聽和聽试聽剂聽(补充件)
A1 普通肉汤培养基聽  
成分:聽 
牛肉膏             聽5.0g聽 
氯化钠             聽5.0g聽 
蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽20.0g聽
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL聽  
制法:将以上成分混合加热溶化,调至pH7.4~7.6,分装试管,121℃高压灭菌30min。
A2 胰蛋白胨大豆肉汤聽  
成分:聽 
胰蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽17.0g聽 
植物蛋白胨             3.0g聽 
氯化钠               5.0g聽 
磷酸氢二钾(K2HPO4)聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽2.5g聽 
葡萄糖               2.5g 
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL聽  
制法:将各成分溶于蒸馏水中,必要时加热使完全溶解,分装于试管或玻瓶中,121℃聽高压灭菌15min,最终pH7.3±0.2。  
注:制备双料胰蛋白胨大豆肉汤时,除蒸馏水外,其他成分加倍,配制10%或20%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤时,可将氯化钠量增加至所需浓度。聽
A3 Baird-Parker培养基聽  
成分:聽 
胰蛋白胨聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽10.0g聽 
牛肉膏                5.0g聽 
酵母膏                1.0g聽 
丙酮酸钠聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽10.0g聽 
甘氨酸聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽12.0g聽 
氯化锂(LiCl·6H2O)         聽聽5.0g聽 
琼脂聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽20.0g聽 
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽950.0mL聽  
制法:将各成分加于蒸馏水中,加热煮沸使完全溶解,冷至25℃,调至pH7.0±0.2,分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15聽min,临用时加热溶化琼脂,冷至50℃左右,于每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平皿培养基,应是致密不透明的,使用前在冰箱贮存不得超过48聽h。聽  
卵黄亚碲酸盐增菌剂配制:聽  
将新鲜鸡蛋浸泡在适当的HgCl2溶液(1:1000)中约1聽min,以无菌操作打开鸡蛋,使蛋黄与蛋白分开,将蛋黄加于生理盐水中(3+7,V/V)充分摇匀,于50mL蛋黄乳液中加入10mL过滤除菌的1%亚碲酸钾水溶液,混匀,4±1℃贮存。聽
A4 甲苯胺蓝-DNA琼脂聽  
成分:聽 
脱氧核糖核酸(DNA)聽      聽聽0.3g聽 
琼脂聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽10.0g聽 
氯化钙(CaCl2无水)       聽1.1g
氯化钠聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽10.0g聽 
甲苯胺蓝(O)聽         聽聽0.083g
三羟甲基氨基甲烷      聽聽聽聽6.1g聽 
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL  
制法:将三羟甲基氨基甲烷溶解于蒸馏水中,调至pH9.0,除甲苯胺蓝(O)外将其余各项成分加热使溶解。再将甲苯胺蓝(O)溶于培养基中。分装于塞有橡皮塞的烧瓶中。如立即使用可不需灭菌。已灭菌的培养基在室温可存放4个月无变化,并经数次熔化后仍可使用。聽
A5 生理盐水聽  成分:                聽
氯化钠             聽8.5g聽 
蒸馏水聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽聽1000.0mL聽  
制法:将氯化钠溶于蒸馏水中,分装于适当容器中,121℃高压灭菌15聽min。
A6 凝固酶试验兔血浆  
临用时取3.8%(取柠檬酸钠3.8聽g加蒸馏水100聽mL,待溶解后过滤,121℃高压灭菌15min)柠檬酸钠1份,加入新鲜兔血4份,混匀后放冰箱中使用球沉降(或以3000r/min离心30min)后取上清液进行试验。聽     聽聽聽
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