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    CCFA琼脂培养基的原理及使用方法

    李令梅
    录入时间:2024-4-15 11:21:55 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、培养基用途:

    聽 用于艰难梭菌的选择性分离培养。


    二、培养基成分及使用方法:

    聽 1.培养基成分

    成分

    含量(g/L)

    胰蛋白胨

    10.0

    牛肉浸粉

    10.0

    酵母粉

    3.0

    葡萄糖

    1.0

    可溶性淀粉

    1.0

    氯化钠

    5.0

    碳酸氢钠

    0.4

    L-半胱氨酸盐酸盐

    0.5

    丙酮酸钠

    1.0

    L-精氨酸

    1.0

    焦磷酸盐

    0.25

    果糖

    6.0

    琥珀酸

    0.5

    氯化血红素

    0.01

    中性红

    0.03

    琼脂

    13.2

    pH 7.2±0.2聽25℃


    聽 2.使用方法

    聽 称取本品 53.20g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL。121℃高压灭菌15min,冷却至45-50℃时,每200mL培养基加入50%卵黄乳液10mL、无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg。混匀,倾入无菌平皿,备用。


    三、 原理:

    聽 蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐酸盐、L-精氨酸、焦磷酸盐、氯化血红素、琥珀酸、丙酮酸钠提供碳源、氮源、维生素和生长因子;果糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;中性红是酸碱指示剂,酸性条件变黄;琼脂是培养基凝固剂;环丝氨酸和头孢西丁可抑制杂菌和其他梭菌;50%卵黄乳液可检验是否产脂酶,艰难梭菌不产生脂酶故无沉淀环。


    四、实验结果:

    聽 1.按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,放置35℃厌氧培养48小时。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    生长情况

    其他特征

    艰难梭菌

    ATCC43593

    /

    生长良好

    黄色菌落,无沉淀环

    产气荚膜梭菌

    ATCC13124

    /

    抑制

    /

    聽 2.艰难梭菌在培养基上的生长情况如下图所示:

    聽聽聽图1-1聽 CCFA琼脂培养基微生物质控结果


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    注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。


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