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    EC-MUG培养基的原理和使用方法

    张宇名
    录入时间:2023-2-14 10:24:06 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、试验原理及用途

    聽 本培养基用于生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌的测定。

    聽 胰蛋白胨提供碳氮源;三号胆盐抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;乳糖是可发酵的糖类;磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透压。大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide 简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366 nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。


    二、培养基配方(g/L)

    胰蛋白胨

    20.0

    乳糖

    5.0

    三号胆盐

    1.5

    磷酸氢二钾

    4.0

    磷酸二氢钾

    1.5

    氯化钠

    5.0

    MUG

    0.05

    pH6.9±0.2(25℃)


    三、试验方法

    聽 1、称取本品37.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,115℃高压灭菌20分钟,备用。

    聽 2、制备菌种悬液,接种到EC-MUG培养基中。

    聽 3、放置于44.5℃±0.5℃恒温培养箱中,需氧培养24 h-48 h。


    四、质控结果

    聽 接种以下质控菌株,放置于44.5℃±0.5℃恒温培养箱中,需氧培养24h-48h。培养结果见图1。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    生长情况

    其他特征

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    10-100

    +++

    有荧光

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 6538

    1000-5000

    -

    抑制

    鼠伤寒沙门氏菌

    ATCC 14028

    10-100

    +++

    无荧光

    大肠埃希氏菌

    ATCC 8739

    10-100

    +++

    有荧光

    大肠埃希氏菌

    CMCC(B) 44102

    10-100

    +++

    有荧光


    EC-MUG培养基的微生物质控结果

    图1 EC-MUG培养基的微生物质控结果


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