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【原理】
聽 甲烷细菌是一类严格厌氧细菌。其可利用CO2，和H2，或乙酸、甲醇等作碳源和能源，可利用无机铵盐作氮源，还需要若干微量元素等。据此，配制本培养基时要将培养基中氧气排除，并将甲烷细菌的这些营养成分分装在无氧试管中，灭菌后用。
【成分】
【制法】
a．液磷酸氢二钾
348mg
磷酸二氢钾
227mg
氯化铵
500mg
硫酸镁
500mg
硫酸铁(FeSO4·7H20)
2mg
氯化钙(CaCl2·2H20)
250mg
H2/CO2(80/20)0.2Pa
0.2Pa(20℃）或
乙酸钠
100mmol
甲醇
200mmol
三甲氨
100mmol
琼脂（液体培养基不加）
20g
氯化钠
2.25g
刃天青
1mg
碳酸氢钠
850mg
蒸留水
1000ml
微量元素溶液(b液）
3ml
维生素溶液(c液）
10ml
b．半胱氨酸
300mg/L
c.Na2S.nH2O(n=7-9)
300mg/L
聽 按照配方a准确秤量，磁力搅拌溶解混匀，倒入烧瓶中加热沸腾使刃青天褪色后，将烧瓶置于冰浴冷却，同时将无氧的CO2/N2(20/80）充入烧内的培养液中，排除其中剩余的氧15分钟，然后用26%NaOH溶液调至pH7.0，接着将培养液分装于无氧小试管中，每管5ml，并在试管气相部分充人H2/CO2(80/20)，立即用胶塞密封，121℃灭菌30分钟备用。
聽 b、c液配制：先量取若干蒸馏水分别放入二只玻璃中，然后分别充入无氧N210分钟，再将预先秤好的b、c溶质分别加入玻璃中，立即用胶塞塞紧，并用铝盖固定，121℃灭菌30分钟备用。
【用途】
聽 分离培养和鉴定甲烷细菌。
【注意事项】
聽 液体培养基在使用之前，要用无菌注射器先经无氧N2冲洗，然后取一定量的b、c溶液注入培养液a中，
充分摇匀后再接种。固体滚管培养基，加热溶化后冷却至55℃左右，加入一定量的b、c溶液，充分摇匀后，立即在冰屑上迅速滚动，使培养基在管壁均匀凝固，然后用无菌接种环取少量菌体，在滚管壁培养基上划线，同时充入无氧的N2/CO2,或H2/CO2(80/20)，接种完毕立即塞紧胶塞培养。
聽
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