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    V-J琼脂培养基的原理和使用方法

    林娇娇
    录入时间:2021-7-23 14:43:28 来源:青岛海博论坛论坛生物

    一、试验原理


    聽本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。


    聽明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。


    二、培养基配方(g/L)


    明胶蛋白胨聽

    10.0

    酵母浸粉

    5.0

    甘露醇

    10.0

    酚红

    0.025

    磷酸氢二钾

    5.0

    氯化锂

    5.0

    甘氨酸

    10.0

    琼脂

    16.0

    pH7.2±0.2 25℃


    三、试验方法


    聽1、称取本品61.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。


    聽2、制备质控菌液,接种到培养基上。


    聽3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。


    四、结果观察与解释


    聽接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量

    回收率

    生长情况

    其它特征

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    10-100

    ≥70%

    +++

    黑色菌落,菌落周围黄色

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 6538

    10-100

    ≥70%

    +++

    黑色菌落,菌落周围黄色

    表皮葡萄球菌

    CMCC(B)26069

    10-100

    ≥70%

    +++

    黑色菌落,菌落周围不变色

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    100-1000

    /

    抑制


    聽V-J琼脂培养基微生物质控结果:






    金黄色葡萄球菌ATCC 25923

    黑色菌落,菌落周围黄色




    金黄色葡萄球菌ATCC 6538

    黑色菌落,菌落周围黄色











    表皮葡萄球菌CMCC(B)26069

    黑色菌落,菌落周围不变色




    大肠埃希氏菌ATCC 25922

    抑制


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    聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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