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      类杆菌-胆汁-七叶苷琼脂(BBE)原理及现象

      纪旭艳
      录入时间:2021-6-29 14:20:52 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、用途及原理


      聽 用于脆弱拟杆菌的选择性分离培养。


      聽 胰蛋白胨、大豆胨提供细菌生长的基本营养,氯化钠维持渗透压,较高含量的牛胆粉可抑制革兰氏阳性菌的生长,并能与氯化血红素一同促进脆弱拟杆菌的生长,庆大霉素为光谱抗生素,对多数肠杆菌、假单胞菌、葡萄球菌、链球菌、芽孢杆菌等有较强的抗菌活性,可抑制多数杂菌的生长,可促进脆弱拟杆菌的生长,琼脂为凝固剂,七叶苷和柠檬酸铁铵为指示剂,脆弱拟杆菌可分解七叶苷生成七叶素,与柠檬酸铁铵反应变黑,使菌落呈现棕黑色。


      二、培养基配方(g/L)


      胰蛋白胨

      15.0

      大豆胨

      5.0

      氯化钠

      5.0

      牛胆粉

      20.0

      七叶苷

      1.0

      柠檬酸铁按

      0.5

      氯化血红素

      0.0125

      庆大霉素

      0.1

      琼脂

      15.0

      pH7.0±0.2 25℃


      三、使用方法及注意事项


      聽 1.称取本品61.6g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时倾入无菌平皿,备用。


      聽 2.用接种环挑取菌液划线接种至BBE平板(或涂布接种),将接种后的平板置于厌氧环境36±1℃培养24-48h。


      注意事项:①培养基中含有的氯化血红素在灭菌后易产生沉淀,倒平板之前需充分进行摇匀。②脆弱拟杆菌为厌氧菌,接触氧气容易死亡,建议应在厌氧工作台中操作;如在正常空气中操作,必须快速完整接种工作并立即转移至厌氧环境中,防止脆弱拟杆菌过量死亡。


      四、试验现象与解释


      聽 接种以下质控菌株,在36±1℃厌氧培养24-48小时:

      质控菌株

      菌株编号

      生长情况

      其他特征

      脆弱拟杆菌

      ATCC25282

      +++

      棕黑色菌落

      金黄色葡萄球菌

      ATCC25923

      -

      抑制


      聽 脆弱拟杆菌在BBE平板上的生长特征:

      棕黑色菌落


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      聽聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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