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      品红亚硫酸钠琼脂培养基的试验原理、方法及现象

      刘凯凤
      录入时间:2021-4-27 10:48:21 来源:青岛海博论坛论坛生物

      一、用途


      聽本产品用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证(GB标准)。


      二、试验原理


      聽蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需碳氮源、维生素和矿物质;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色;乳糖为可发酵的糖类,乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。


      三、培养基配方(g/L)


      蛋白胨 10.0
      牛肉粉 5.0
      酵母粉 5.0
      磷酸氢二钾 3.5
      乳糖 10.0
      琼脂 13.0
      碱性品红 1.0
      亚硫酸钠 5.0
      pH7.2-7.4 25℃


      四、试验方法


      聽1.称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解,按需分装,116℃高压灭菌20min,备用;


      聽2.质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成;


      聽3.取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中;


      聽4.将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2h,观察实验结果。


      五、试验结果判断


      聽1.外观


      聽此干燥培养基呈紫色粉末状态,高压灭菌后制备好的固体培养基为浅红色。


      聽2.生物学实验


      聽接种以下质控菌株,放入培养箱中,于36±1℃培养24±2h,观察试验结果。

      质控菌株

      菌株编号

      接种量(CFU)

      方法

      质控情况

      大肠埃希氏菌

      ATCC 25922

      20-200

      定量

      PR≥0.7,紫红色菌落,有金属光泽

      大肠埃希氏菌

      ATCC 8739

      20-200

      定量

      PR≥0.7,紫红色菌落,有金属光泽

      弗氏柠檬酸杆菌

      ATCC 43864

      20-200

      定量

      PR≥0.7,紫红色菌落,稍有金属光泽

      鼠伤寒沙门氏菌

      ATCC 14028

      /

      定性

      橙红色菌落

      粪肠球菌

      ATCC 29212

      /

      半定量

      G≤1


      聽品红亚硫酸钠琼脂培养基微生物质控结果:






      大肠埃希氏菌ATCC 25922

      紫红色菌落,有金属光泽




      大肠埃希氏菌ATCC 8739

      紫红色菌落,有金属光泽











      弗氏柠檬酸杆菌ATCC 43864

      紫红色菌落,稍有金属光泽




      鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028

      橙红色菌落







      粪肠球菌ATCC 29212

      抑制


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      聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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