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        半固体培养基的使用方法及质控结果

        聽许英俊
        录入时间:2020-10-30 10:41:17 来源:青岛海博论坛论坛生物

        一、培养基用途


        聽用于动力观察,菌种保存,H抗原位相变异试验等。聽聽


        二、培养基基础成分(g/L)


        蛋白胨

        10.0

        牛肉浸粉

        3.0

        琼脂

        4.0

        氯化钠

        5.0

        pH值7.4±0.1

        25℃


        三、试验原理


        聽蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。


        四、培养基用法


        聽称取本品22.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸溶解,分装小试管,121℃高压灭菌15分钟,直立凝固,备用。

        聽此溶液相当于多价鞭毛抗原(H)鉴定中,0.3%~0.4%半固体琼脂的小玻管中的溶液。

        聽如需配置0.55%~0.65%半固体琼脂平板,需在每1000ml溶液中添加1.5~2.5g琼脂即可。


        五、质控


        聽(1)制备好的培养基,穿刺接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。质控标准如下:


        质控菌株

        菌株编号

        接种量(CFU)

        参比或计数培养基

        方法

        质控结果

        其他特征

        大肠埃希氏菌

        ATCC25922

        >5000

        /

        定性

        阳性,扩散生长

        /

        蜡样芽胞杆菌

        CMCC(B)63303

        >5000

        //

        定性

        阳性,扩散生长

        //

        福氏志贺氏菌

        ATCC12022

        >5000

        /

        定性

        阴性,沿穿刺线生长


        宋内氏志贺氏菌

        ATCC25931

        >5000

        /

        定性

        阴性,沿穿刺线生长

        /


        聽(2)质控菌株在该培养基中培养试验结果如下图:质控阳性菌除了在穿刺接种的穿刺线上生长外,在穿刺线的两侧均可见羽毛状或云雾状浑浊生长;质控阴性菌只沿穿刺线呈明显的线状生长。




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        聽注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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