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          甘露醇高盐琼脂培养基原理和使用方法

          丁鑫鑫
          录入时间:2019-9-27 14:11:47 来源:青岛海博论坛论坛生物

          一、试验原理:

          用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

          蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;7.5%浓度氯化钠可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生长;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂。

          二、培养基配方(g/L):

          蛋白胨

          10.0

          牛肉粉

          1.0

          D-甘露醇

          10.0

          氯化钠

          75.0

          酚红

          0.025

          琼脂

          13.0

          pH 7.4±0.2 25℃

          三、试验方法:

          粉体装培养基的使用:

          1.称取本品109.0g,加入1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌煮沸1分钟。121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

          2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

          3.制备质控菌液。

          4.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

          5.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

          6.36±1℃倒置培养基培养24-48小时,记录实验结果。

          四、结果观察与解释:

          接种以下质控菌株,36±1℃倒置培养基培养24-48小时:

          质控菌株

          菌株编号

          接种量(CFU)

          参比或计数培养基

          方法

          质控评定标准

          其他特征

          大肠埃希氏菌

          ATCC25922

          100-1000

          /

          半定量

          G≤1

          部分或完全抑制

          鼠伤寒沙门氏菌

          ATCC14028

          100-1000

          /

          半定量

          G≤1

          部分或完全抑制

          表皮葡萄球菌

          CMCC(B)26069

          10-100

          TSA

          定量

          PR≥0.7

          红色菌落

          金黄色葡萄球菌

          ATCC6538

          10-100

          TSA

          定量

          PR≥0.7

          黄色菌落,菌落周围黄色

          金黄色葡萄球菌

          ATCC25923

          10-100

          TSA

          定量

          PR≥0.7

          黄色菌落,菌落周围黄色


          图1-2聽甘露醇高盐琼脂微生物质控结果

          备注:a:金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26003),b:表皮葡萄球菌,c:大肠埃希氏菌,d:金黄色葡萄球菌(ATCC6538),

          e:沙门氏菌


          五、注意事项:

          本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

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          注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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