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强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)原理和使用方法

丁鑫鑫
录入时间:2023-1-17 10:45:48 来源:青岛海博论坛论坛生物

一、试验用途及原理:

聽 用于食品和其他物质中梭菌的培养和计数。

聽 胰酪蛋白胨,牛肉浸粉,蛋白胨,可溶性淀粉,酵母浸粉和L-半胱氨酸盐提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;刃天青是氧化还原指示剂;醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌;柠檬酸铁铵和亚硫酸钠是硫化氢指示剂;琼脂是培养基凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

胰酪蛋白胨

5.0

蛋白胨

5.0

牛肉浸粉

8.0

可溶性淀粉

1.0

酵母粉

1.0

葡萄糖

1.0

L-半胱氨酸盐酸盐

0.5

醋酸钠

5.0

刃天青

0.002

柠檬酸铁铵

0.5

亚硫酸钠

0.75

琼脂

15.0

pH 7.6±0.2 25℃


三、试验方法:

聽 粉体装培养基的使用:

聽 1. 称取本品 42.75g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌15分钟,备用。

聽 2. 制备质控菌液。

聽 3. 吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内,每个稀释度做两个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的待测培养基15ml,缓慢旋转平皿,使质控菌液和培养基充分混匀。

聽 上述琼脂平板凝固后,再加入10ml冷却至50℃的待测培养基均匀覆盖平板表层。

聽 4. 待琼脂凝固后,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


四、结果观察与解释

聽 接种以下质控菌株,正置于厌氧培养装置内36±1℃培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

产气荚膜梭菌

ATCC13124

20-200

TSC

定量

PR≥0.7

黑色菌落


强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果

图1-1聽强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)微生物质控结果


五、注意事项

聽 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博论坛论坛生物原创,未经允许不得转载。

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